如何用祎鴻凱氏定氮儀測定雞蛋內(nèi)的蛋白質(zhì)含量？

氨基酸是由具有酸性的羧基( - COOH) 和堿性的氨基( - NH2) 相互作用而形成的一種中性的內(nèi)鹽, 當(dāng)在堿性條件下加入甲醛溶液時, 氨基酸便與甲醛反應(yīng), 形成一種化合物,該化合物氨基上的2 個氫原子被次甲基所取代, 于是便失去了氨基的堿性特性, 從而使其呈酸性的羧基釋放出來, 并使其溶液的電化學(xué)特性發(fā)生變化。由于該化學(xué)反應(yīng)是可逆的,而且一定要有適當(dāng)過量的甲醛存在, 才能使該反應(yīng)進行充分并迅速達到化學(xué)反應(yīng)平衡狀態(tài), 這樣就可以利用直接電位方法求出牛奶中游離氨基酸的含量, 并且再根據(jù)生鮮牛奶中的游離氨基酸與其蛋白質(zhì)總量之間保持衡定比例關(guān)系的原理,利用電位法直接求出牛奶中蛋白質(zhì)的含量。但是, 由于牛奶本身膠體溶液體系的復(fù)雜多變性以及直接電位法在測定中易受其它多種因素干擾等諸多原因, 使其測定值與實際含量之間可能存在著較大的偏差。為了使直接電位法測定牛奶中的蛋白質(zhì)含量的這一方法變?yōu)楝F(xiàn)實,可將凱氏定氮法所測定的牛奶中蛋白質(zhì)的含量對牛奶與甲醛溶液在反應(yīng)后的平衡電位值作圖, 再經(jīng)過計算機數(shù)據(jù)處理, 得出了牛奶中蛋白質(zhì)的含量與其最終平衡電位值之間的線性回歸關(guān)系方程。這樣就可以通過測定其電位值, 并經(jīng)過標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性回歸方程的計算, 直接得到牛奶中蛋白質(zhì)的含量。